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揮發(fā)油測(cè)定器技術(shù)文章

商品說(shuō)明：揮發(fā)油測(cè)定器用于制藥工業(yè)，藥物，植物組織中含有揮發(fā)成分的精油測(cè)定，分為兩套：有兩支測(cè)定管，一種回水管呈大三角，用于比重小于1.0的測(cè)定；另一種呈小三角，用于比重大于1.0的測(cè)定。
揮發(fā)油是一類重要的活性成分，臨床上除直接應(yīng)用主要含揮發(fā)油的生藥外，還可應(yīng)用從中精制的揮發(fā)油，如桉葉油、薄荷油等。
　　《中國(guó)藥典》( 2005 年版)收載的揮發(fā)油有八角茴香油 (oleum anisi stellciti) 、肉桂油 (oleum cinnamomi) 、桉油 (oleum eucalypti) 、薄荷油 (oleum menthae) 、丁香羅勒油 (oleum ocimi gratissimi) 、滿山紅油 (oleum rhododendri daurici) 、松節(jié)油 (oleum terebinthinae) 、廣藿香油 (oleum pogostemonis) 、莪術(shù)油 (oleum curcumae) 和牡荊油 (oleum viticis negundo) 等十種。
( 一 ) 化學(xué)組成
　　揮發(fā)油為多種類型成分的混合物，一種揮發(fā)油往往含有幾十種到一、二百種成分，其中以某種或數(shù)種成分占較大的份量。其基本組成為脂肪族、芳香族和萜類化合物。揮發(fā)油中存在的萜類主要是單萜和倍半萜，通常它們含量較高，但無(wú)香氣，不是揮發(fā)油的芳香成分。而某些萜類的含氧衍生物及芳香族化合物含量雖少，但它們具有揮發(fā)油的特異芳香味和顯著的生物活性。
脂肪族化合物如魚腥草中的甲基正壬酮 (methylnonylketone) 、松節(jié)油中的正庚烷 (n-keptane) 、桂花中的正癸烷 (dacane) 等。芳香族化合物如丁香油中的丁香酚 (eugenol) 、肉桂中的桂皮醛 (cinnamaldehyde) 等。萜類化合物如薄荷中的薄荷醇、薄荷酮，姜黃中的姜黃酮 。
揮發(fā)油的組成除了上述三類物質(zhì)外，還有一些其它化合物，如當(dāng)歸、川芎和藁本等藥材中苯酞類成分藁本內(nèi)酯 (ligustilide) 、洋川芎內(nèi)酯 A (senkyunolide A) 等。洋苷菊中 薁 (azulenoids) 類化合物藍(lán)香油 薁 (chamazulene) 。大蒜中的含硫化合物大蒜辣素 (allicin) 。芥子中的含氮和硫的化合物芥子油 (allyl isothiocyanate) 。
( 二 ) 理化性質(zhì)
　　大多數(shù)揮發(fā)油為無(wú)色或淡黃色油狀透明液體。少數(shù)含有薁類化合物或溶有色素的揮發(fā)油具有顏色；揮發(fā)油具特殊的香氣或其它氣味，多具刺激性的灼熱或辛辣味；揮發(fā)油在常溫下可揮發(fā)，并不留下持久性的油斑；大多數(shù)揮發(fā)油比水輕，僅少數(shù)比水重(如丁香油，桂皮油等)；揮發(fā)油易溶于醚、石油醚、二硫化碳和脂肪油等有機(jī)溶劑中，能*溶于無(wú)水乙醇，在其他濃度的醇中只能溶解一定的量，當(dāng)揮發(fā)油中摻有脂肪油或萜烯類成分時(shí)，在一定濃度乙醇中的溶解度就會(huì)減少。因此藥典規(guī)定了揮發(fā)油在醇中的溶解度可以檢查揮發(fā)油的純度；揮發(fā)油在水中的溶解度很小；大多揮發(fā)油具有光學(xué)活性，揮發(fā)油中主成分的含量和旋光度有一定的比例關(guān)系；揮發(fā)油都具有強(qiáng)的折光性。折光率常因貯藏日久或不當(dāng)而增高。當(dāng)有雜質(zhì)時(shí)，折光率就會(huì)改變；揮發(fā)油在常溫下大多為液體，少數(shù)為固體，如八角茴香油；揮發(fā)油在空氣中久置或光線照射，會(huì)逐漸氧化變質(zhì)，使其比重增加，顏色變深，并失去原有的香氣，形成樹脂樣物質(zhì)，也不能隨水蒸餾了。
《中國(guó)藥典》( 2005 年版)收載的揮發(fā)油的物理常數(shù)見(jiàn)表 3-5 。
表 3-5 《中國(guó)藥典》( 2005 年版)收載揮發(fā)油的物理常數(shù)(按相對(duì)密度次序排列)
名稱在醇中的溶解度相對(duì)密度旋光度折光率
松節(jié)油易溶0.850~0.870—1.466~1.477
薄荷油能任意混合0.888~0.908-17 ° 至 -24 °1.456~1.466
牡荊油與無(wú)水乙醇任意混合0.890~0.910—1.485~1.500
桉油易溶于 70% 乙醇0.890~0.920—1.458~1.468
滿山紅油任意混合0.935~0.950—1.500~1.520
廣藿香油易溶于 90% 乙醇0.950~0.980-66 ° 至 -43 °1.503~1.513
莪術(shù)油易溶0.970~0.990+20 ° 至 +25 °1.500~1.510
八角茴香油易溶于 90% 乙醇0.975~0.988-2 ° 至 +1 °1.553~1.560
丁香羅勒油易溶1.030~1.050—1.530~1.540
桂皮油易溶1.055~1.070—1.602~1.614
( 三 ) 提取
　　揮發(fā)油常用的提取方法有蒸餾法、溶劑提取法和臨界萃取法。近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的臨界二氧化碳萃取法，因其具有環(huán)保、安全、溶劑可重復(fù)使用、萃取液不需要高溫濃縮等優(yōu)點(diǎn)，保證了揮發(fā)油中熱敏感成分的穩(wěn)定，成為揮發(fā)油成分提取的理想方法。
( 四 ) 主要定量方法及舉例
1. 總揮發(fā)油的定量
　　《中國(guó)藥典》( 2005 年版)中一些生藥規(guī)定了揮發(fā)油的含量要求。如八角茴香含揮發(fā)油不得少于 4.0% ，山柰含揮發(fā)油不得少于 4.5% ，片姜黃含揮發(fā)油不得少于 1.0% 等。
　　《中國(guó)藥典》( 2005 年版)附錄詳細(xì)介紹了揮發(fā)油的測(cè)定裝置和兩種測(cè)定方法。
藥典規(guī)定測(cè)定用的供試品，除另有規(guī)定外，須粉碎使能通過(guò)二號(hào)至三號(hào)篩，并混合均勻。
( 1 )儀器裝置 如圖 3-9 。 A 為 1000ml( 或 500ml 、 2000ml) 的硬質(zhì)圓底燒瓶，上接揮發(fā)油測(cè)定器 B ， B 的上端連接回流冷凝管 C 。以上各部均用磨口玻璃連接。測(cè)定器 B 應(yīng)具有 0.1ml 的刻度。全部?jī)x器應(yīng)充分洗凈，并檢查接合部分是否嚴(yán)密，以防揮發(fā)油逸出。
( 2 )測(cè)定法 甲法 本法適用于測(cè)定相對(duì)密度在 1.0 以下的揮發(fā)油。取供試品適量(約相當(dāng)于含揮發(fā)油 0.5~1.0ml) ，稱定重量(準(zhǔn)確至 0.01g) ，置燒瓶中，加水 300~500ml (或適量)與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合后，連接揮發(fā)油測(cè)定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油測(cè)定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止。置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱至沸，并保持微沸約 5 小時(shí)，至測(cè)定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻。開(kāi)啟測(cè)定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達(dá)刻度 0 線上面 5mm 處為止。放置 1 小時(shí)以上，再開(kāi)啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度 0 線平齊，讀取揮發(fā)油量，并計(jì)算供試品中揮發(fā)油的含量 ( ％ ) 。
　　乙法 本法適用于測(cè)定相對(duì)密度在 1.0 以上的揮發(fā)油。取水約 300ml 與玻璃珠數(shù)粒，置燒瓶中，連接揮發(fā)油測(cè)定器。自測(cè)定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止。再用移液管加入二甲苯 lml ，然后連接回流冷凝管。將燒瓶?jī)?nèi)容物加熱至沸騰，并繼續(xù)蒸餾，其速度以保持冷凝管的中部呈冷卻狀態(tài)為度。 30 分鐘后，停止加熱，放置 15 分鐘以上，讀取二甲苯的容積。然后照甲法自 “ 取供試品適量 " 起，依法測(cè)定，自油層量中減去二甲苯量，即為揮發(fā)油量，再計(jì)算供試品中揮發(fā)油的含量 ( ％ ) 。
2. 生藥揮發(fā)油中的主要成分或特殊成分定量
　　由于生藥中所含的揮發(fā)油均為混合物，常由十幾種乃至上百種化合物組成，在進(jìn)行定量、定性分析時(shí)分離是關(guān)鍵，所以色譜法成為揮發(fā)油分析的主要方法，尤其是氣相色譜法，例如中國(guó)藥典廣藿香中百秋李醇，丁香羅勒油中丁香酚都是用氣相色譜法分析。高效液相色譜法也是揮發(fā)油成分的常用分析方法，對(duì)那些熱敏感成分的分析尤其重要，如中國(guó)藥典莪術(shù)油中牻牛兒酮的高效液相色譜法測(cè)定。川芎油中苯酞類和酚酸類成分由于熱不穩(wěn)定性，也適合用高效液相色譜法分析。
　　川芎油主要成分的高效液相色譜分析
　　對(duì)照品 香草醛 (vallinin ，1) 、阿魏酸 (ferulic acid ，2) 、川芎嗪 (tetramethylpyrazine ，3) 、 senkyunolide I (4) 、 senkyunolide H (5) 、洋川芎內(nèi)酯 A (senkyunolide A ，6) 、 coniferylferulate (7) 、藁本內(nèi)酯 (Z-ligustilide ，8) 、新蛇床內(nèi)酯 (neocnidilide ，9) 、丁烯基苯酞 (3-butylidenephthalide ，10) 、 riligustilide (11) 和 levistolide A (12) 。
　　色譜柱： Waters Symmetry C 18 (150 ′ 4.6 mm ， 5 m m) ；保護(hù)柱： Waters Spherisorb S5 ODS2 (10 ′ 4.6 mm) ；流動(dòng)相： A 甲醇， B 水(含 0.25% 醋酸)；梯度洗脫條件：線性梯度 32% B(0-3min) ， 32-85%B(3-36min) ， 85-100%B(36-43min) ， 100%B(43-52min) ；流速： 0.7ml/min ； DAD 設(shè)定范圍 190-400nm 。
      (揮發(fā)油又稱精油,英文為 essential oils，是存在于植物中的一類具有芳香氣味、可隨水蒸氣蒸餾出來(lái)而又與水不相混溶的揮發(fā)性油狀成分的總稱。揮發(fā)油為一混合物，其組份較為復(fù)雜。主要通過(guò)水蒸氣蒸餾法和壓榨法制取精油.揮發(fā)油成分中以萜類成分多見(jiàn)，另外，尚含有小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物。
　　揮發(fā)油多為無(wú)色或淡黃色油狀液體，多具特殊的香氣或辛辣味。比重在0.850—1.180之間，易溶于無(wú)水乙醇、醚類、氯仿、二硫化碳、和脂肪油中，難溶于水。揮發(fā)油均有一定得旋光性和折光率，折光率是鑒定揮發(fā)油品質(zhì)的重要依據(jù)。放置過(guò)久易氧化聚合，是顏色加深或成樹脂狀，故應(yīng)密閉、低溫和避光保存.